张林 , 金羽琨 , 孟祥鹏 , 王丕武^*

吉林农业大学农学院,长春, 130118
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17 卷, 第 15 篇   
收稿日期: 2018年03月30日    接受日期: 2018年04月30日    发表日期: 2019年01月29日

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通过转抗虫基因来提高作物的抗虫性是一条有效途径，以此来提高作物的产量和品质。本研究以转抗虫基因 Cry1Iem 大豆的 T2、 T3 株系作为试验材料，利用常规 PCR 检测、 Southern杂交、荧光定量 PCR技术对转抗虫基因 Cry1Iem 株系进行分子鉴定；同时对 40个转基因阳性株系进行室内人工接虫、 200个转基因阳性株系室外网室接虫并进行抗虫性鉴定。选取其中 10个株系进行常规 PCR检测，结果在 T2、 T3 当中都检测到了 Cry1Iem、 Bar、启动子 CaMV35S、 Nos 目标片段，表明目的基因已被顺利导入受体 JN28大豆植株当中并得到了稳定遗传；选取其中 5 个 T2、 T3 转基因株系进行 Southern杂交，结果显示：目的基因以单拷贝的 形式整合到了大豆基因组当中； 荧光定量 PCR 检测结果表明， Cry1Iem 基因在选取的 3 个转基因株系中均 得到了表达，而在非转化的受体 JN28当中未检测到荧光信号。室内抗虫性鉴定结果显示 40个转Cry1Iem基因株系豆荚内活虫的成活数量明显低于受体材料 JN28 大豆豆荚内的活虫数量，表明转基因材料具有显著的抗虫性。室外抗虫性鉴定结果表明： JN28 大豆受体植株的虫食率为 6.72%，属于感虫品种；而 200 个转Cry1Iem基因株系的平均虫食率为3.81%，属于抗虫品系。本研究结果为中国转基因抗虫大豆新品种的选育提供部分参考数据。

转抗虫基因；Cry1Iem大豆；分子鉴定；功能验证